1、体积测量法：又称测菌丝浓度法。 原理：通过测定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。 菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有偏差。 2、称干重法： 原理：利用离心或过滤法测定。一般干重为湿重的10-20%。称干重方法较为烦琐，通常获取的微生物产品为菌体时，常

微生物的生长伴随着一系列生理指标发生变化，例如酸碱度，发酵液中的含氮量，含糖量，产气量等，与生长量相平行的生理指标很多，它们可作为生长测定的相对值。 1、测定含氮量： 大多数细菌的含氮量为干重的12.5%，酵母为7.5%，霉菌为6.0%。根据含氮量×6.25，即可测定粗蛋白的含量。含氮量的测定方法有很多，如用硫酸，过氯酸，碘酸，磷酸等消化法和Dumas测氮气法。 2、测定含碳量： 将少量（干重0.2-2.0 mg）生物材料混入1毫升水或无机缓冲液中

液氮超低温保藏技术是将菌种保藏在-196℃的液态氮，或在-150℃的氮气中的长期保藏方法，它的原理是利用微生物在-130℃以下代谢趋于停止而有效地保藏微生物。 操作步骤如下： 1.安瓿管或冻存管的准备 用圆底硼硅玻璃制品的安瓿管，或螺旋口的塑料冻存管。注意玻璃管不能有裂纹。将冻存管或安瓿管清洗干净， 121℃下高压灭菌15-20分钟，备用。 2.保护剂的准备 保护剂种类要根据微生物类别选择。配制保护剂时，应注意其浓度，一般采用10-20%甘油。

将菌种保藏在-80℃冰箱中以减缓细胞的生理活动进行冷冻的一种保藏方法。 操作步骤如下： 1.安瓿管的准备 安瓿管材料以中性玻璃为宜。清洗安瓿管时，先用2%盐酸浸泡过夜，自来水冲洗干净后，用蒸馏水浸泡至pH中性，干燥后、贴上标签，标上菌号及时间，加入脱脂棉塞后，121℃下高压灭菌15-20分钟，备用。 2.保护剂的选择和准备 保护剂种类要根据微生物类别选择。配制保护剂时，应注意其浓度及pH值，以及灭菌方法。如血清，可用过滤灭菌；牛奶

微生物长期受到外界的影响，遗传性状必然发生某些变异。正是由于变异的存在才使得生物向前进化。然而由于突变的存在，菌种在培养或保藏过程中，可能会出现某些优良生产性状的劣化、遗传标记丢失、典型特征改变等现象，称为菌种衰退。比如苏云金芽孢杆菌由于菌种衰退，导致其新生的菌体芽孢和伴孢晶体都比较小；保藏的沙门氏菌鞭毛抗原丢失，导致H多价血清不凝固等。 菌种衰退的根本原因是有关基因的负突变。如果控制产量的基因发生

采用已衰退菌种进行生产会影响生产效率，而把已衰退菌种作为阳性菌株进行检验，则会影响检验正确率。既然变异是不可避免的，那么我们应该如果避免菌种衰退呢？ 1、控制传代次数 尽量避免不需要的移种和传代，把需要的传代减少到低水平以减少突变几率。传代次数越多，产生突变的几率就越大，菌种发生衰退的机会就越高。在实验室检验或者是生产实际中，应严格控制传代次数。中国药典当中规定，培养基灵敏度检查所用的菌株传代次数不得

一、关于哈茨木霉菌 木霉菌是自然界广泛分布的真菌，是土壤微生物的重要群落，自1932年，Windling 初次发现木霉菌对植物病原真菌有拮抗作用，木霉菌便开始受到关注，后被广泛运用于农业生产之中。 哈茨木霉大显身手-防治生姜土传病(图2)显微镜下的木霉菌 木霉菌属于半知菌类的丝孢纲丛梗孢目丛梗孢科，地球上已知的大概有80多种木霉菌，能够快速产生孢子，可以市场化的主要有哈茨木霉、深绿木霉、长枝木霉菌、短密木霉等。 二、哈茨木霉菌

近年来，土豆、大姜种植蓬勃发展，面积逐年扩大，但也产生了一些问题。 比如化肥的不合理使用、重茬等诸多原因导致的作物根部病害频繁发生。 哈茨木霉菌面世阻断土豆大姜土传病害侵染，那么什么是哈茨木霉菌？ 作用机理又是什么？ 哈茨木霉菌应用作物：各种蔬菜、瓜果、花卉等。哈茨木霉菌防治对象：作物白粉病 、霜霉病、 根腐病、立枯病、猝倒病、灰霉病、炭疽病、大姜姜瘟病、土豆早晚疫病，草莓死棵烂苗等。 一、什么是哈茨木霉

单端孢霉烯毒素在自然界中广泛存在的六大类常见的真菌毒素之一，对生物体蛋白质合成有明显的抑制作用。木霉菌(Trichoderma spp.)属于半知菌亚门丝状真菌,是重要的酶和抗生素的生产菌株,也常用作植物生长促进剂和生物杀菌剂的生产。已经有大量的研究报道证明木霉菌能够产生大量的单端孢霉烯毒素，并在农业生物防治中得到广泛应用。其中harzianum B不仅对双子叶和单子叶均有明显的植物毒性，具有开发为除草剂的潜力，同时还发现harzianum B是一种具

绿色木霉（Trichoderma atroviride）是木霉菌的一种，在自然界分布广泛，且部分菌株具有防病、促生、产酶等多种功能。目前生产上已有绿色木霉开发的生物农药和生物肥料制剂，能够有效防治土传病害、促进植株健康生长，在保障农业绿色可持续发展中起到重要作用。 鉴于绿色木霉不同菌株之间存在功能差异以及同一菌株也可能具有多种不同功能。因此，这一类真菌一直以来也是研究人员关注的重点。国际著名期刊《plant, cell & environment》上发表了

深绿木霉是一种常见植物有益微生物，可以通过产生抗生素、营养竞争、微寄生、细胞壁分解酵素、以及诱导植物产生抗性等多种作用方式，抑制植物病原的生长、抵御病害的发生，可有效防治土传性病害，是目前生产与应用最普遍的一类生防真菌。 2021年7月19日，微生物学顶级期刊The ISME Journal刊登了墨西哥瓜纳华托Advanced Genomics Unit-Langebio的KarinaAtriztán-Hernández & Alfredo Herrera-Estrella的研究成果《Drosophilaattack inhibits hyphal regeneration and defense mechanisms ac

同一物种细胞之间的融合是一个多步骤的过程，包括融合能力的诱导、潜在伙伴细胞的识别和交流、定向生长、细胞-细胞接触的建立、细胞壁重建，最后是质膜融合。病原真菌通过萌发的分生孢子融合成超细胞网络，进而在植株体内发展形成菌丝造成病害的发生。基因完全相同的细胞相互引导生长并融合形成功能单元，功能单元之间通过相互协调的方式“征服”新的领地。这种合作行为的有助于为真菌单个孢子提供资源，避免分离导致基因相同的菌

堆肥是利用各种有机废物通过微生物发酵将可降解的有机物转化为稳定的腐殖质的技术。这种好氧发酵技术可以促进有机废物的养分转化，减少温室气体排放，调节微生物活性，降低抗生素耐药基因的丰度。随着科技的发展和进步，人们对有机肥的要求也越来越高。一种好的堆肥产品不仅需要丰富的营养成分来促进作物生长，还必须防止土传疾病的发生。因此，在堆肥中添加一些多功能生物防治微生物、发酵菌或细菌接种剂进行好氧发酵，既促进了堆

根瘤菌（rhizobium, Rh）是一类革兰氏阴性细菌，广泛分布于土壤中，能够与豆科植物共生结瘤固氮，将大气中分子态氮转化为供宿主植物吸收利用，进而促进植株生长发育。根瘤在形成过程中也会因宿主植物的不同而产生不同的类型，如与大豆、百脉根形成有限型根瘤；与苜蓿、豌豆形成无限型根瘤两种类型。豆科植物根瘤是天然高效、“节能环保”的固氮工厂，占生物固氮的70%，可满足豆科植株50-80%，甚至100%的氮元素需求。近些年，美国及亚马逊流

木霉属真菌(Trichoderma)是土壤微生态菌群的重要组成部分，具有在植物根系定植的能力。系统解析木霉的特性，包括代谢活性、与植物和其他微生物的相互作用机制等可以确保其在农业上的高效利用。木霉对多种土壤植物病原菌具有直接和间接的生防潜力。近期，Tyśkiewicz等人对木霉在农业生产上的应用和作用机制进行了系统总结。 图1拟康宁木霉菌的菌丝、分生孢子梗及分生孢子的形态 木霉对植物病原菌的生防特性 木霉利用各种复杂的直接或间接机

利用细菌固定气态氮（N2）是将氮同化到生物环境中的主要自然手段。其中与农业最为直接相关的是根瘤菌对氮气的还原，并通过与豆类作物形成共生关系高效利用气态氮为寄主提供营养。利用这种方式每年可以产生约2亿吨结合态氮。根瘤菌主要寄生在大豆（Glycine max）、豇豆（Vigna unguiculata）和四季豆(Phaseolus vulgaris)等豆科作物根部的器官中，并大量增殖形成“根瘤”。在根瘤微环境中，为这些细菌的生长创造了一个营养充足而且几乎没有竞争的生态

寡雄腐霉(Pythium oligandrum)属卵菌纲(Oomycete)霜霉目(Peronosporales)腐霉科(Pythiaceae)腐霉属(Pythium)，是自然界中存在的一种具有较强攻击性的寄生真菌，能够定殖在多种作物根围，进而抑制或杀死其它土传病菌，其分泌的纤维素酶、蛋白酶、脂肪酶和β-1,3-葡聚糖酶等多种胞外酶可以水解病原真菌的细胞壁。寡雄腐霉也可以产生抗菌物质，抑制病菌孢子萌发和菌丝生长，同时产生的寡雄蛋白(oligandrin)能提高抗氧化保护酶的活性，刺激植物防卫反应并产生诱导抗

长期过量使用农药不仅对环境造成了巨大负担，也增加了害虫的耐药性。为了保持田间生态系统的长久稳定，利用环境友好且不易产生耐药性的昆虫病原真菌进行病害防控已取得了较大进展。如球孢白僵菌(Beauveria bassiana)、金龟子绿僵菌(Metarhiziumanisopliae)、淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)等广泛应用于农田、温室等环境的害虫防治。球孢白僵菌侵入寄主后能够产生多种毒素，主要包括白僵菌素（beauvericin）、白僵菌黄色素(bassianin)、白僵菌环四肽(bassianolide

印度梨形孢Piriformospora indica是一种可培养的植物根部内生真菌，可通过生长素的产生影响植物根系的生长。此外，还能够增强养分吸收并提高宿主对各种生物和非生物胁迫的抵抗力。例如，印度梨形孢可以显著减轻尖孢镰刀菌、大丽轮枝菌和凤果花叶病毒等病原微生物侵染番茄引起的病害；还能够在干旱条件下激活玉米内源激素介导的信号通路提高抗旱能力。 植物激素主要包括生长素、细胞分裂素、赤霉素、脱落酸、乙烯、水杨酸和茉莉酸等，在植

青霉菌种类繁多，分布广泛，在土壤、空气等环境中存在大量青霉菌的繁殖体，目前已知的超过300个种。青霉菌多数情况下为无性繁殖，菌丝生长形成多细胞分生孢子梗，随后顶端可继续分生为指状分枝，每个分枝顶端着生2-3个瓶状细胞，其上产生一串链状的青绿到褐色分生孢子，性状似扫帚。因此而得名Penicillium。 图1 青霉菌分生孢子梗及分生孢子的显微形态（来源：网络） 提起青霉菌，我们最先想到的是青霉素，这是在1928年由细菌学家弗莱明在

菌根是植物与菌根真菌在长期的生存过程中共同进化形成的互利共生的状态。菌根既有利于提高植物抗御不良环境的能力，促进植物生长，也更够为菌根真菌的生存提供充足的营养物质。丛枝菌根真菌（Arbuscularmycorrhizalfungus，AMF）可与80%以上的陆生植物建立共生关系，并且广泛存在于各类农田土壤中。AMF可以作为生物调节剂促进作物生长、开花和产量；作为生物保护剂可以减缓生物和非生物胁迫对植物的影响；作为生物肥料能够刺激植物的养分摄取。

木霉菌属半知菌类的丝孢纲丛梗孢目丛梗孢科木霉属，广泛存在于不同环境条件下的土壤或植物根系中，是世界上最重要的真菌之一。经大量研究证实它们对植物病原真菌、细菌及昆虫具有拮抗防治能力，主要通过竞争、分泌抗生素和重寄生等作用机制来抑制植物病原体及昆虫的生长。此外，经证实木霉属能提高农作物的抗逆性，促进植物生长和提高农产品产量，因此被广泛用于开发生防制剂、微生物肥料及土壤改良剂。 沈阳农业大学林学院刘志华

篮状菌(Talaromyces sp.)是一类重要的真菌，隶属于真菌界，子囊菌门，散囊菌纲，散囊菌目，发菌科，最初是青霉菌的有性型属。直至1955年，Benjamin提出有性型的属名Talaromyces，最终Talaromyces成为了一个崭新的独立类群。篮状菌(Talaromyces sp.)广泛分布于植物、土壤和海洋生物中，篮状菌是自然界中重要的分解者，许多种与植物、动物和人类密切相关，比如能产生高活性的木质纤维素酶类，产生大量颜色鲜艳的黄色或红色色素，还有些种能够促进植物对矿物

篮状菌(Talaromyces sp.)是一类重要的真菌，隶属于真菌界，子囊菌门，散囊菌纲，散囊菌目，发菌科，最初是青霉菌的有性型属。直至1955年，Benjamin提出有性型的属名Talaromyces，最终Talaromyces成为了一个崭新的独立类群。篮状菌(Talaromyces sp.)广泛分布于植物、土壤和海洋生物中，篮状菌是自然界中重要的分解者，许多种与植物、动物和人类密切相关，比如能产生高活性的木质纤维素酶类，产生大量颜色鲜艳的黄色或红色色素，还有些种能够促进植物对矿物

小麦赤霉病（Fusarium head blight, FHB）是全球小麦栽培生长中的主要病害之一，该病害从小麦苗期到穗期均可发生，其中穗腐病危害最为严重，可直接导致产量和品质下降。小麦赤霉病在我国南方冬麦区，如长江中、下游冬麦区，川滇冬麦区和华南冬麦区等地经常流行为害；东北三江平原春麦区在多雨年份也可流行成灾。病害大流行年份小麦病穗率在50%～100%，产量损失20%～40%。2001—2018年共发生了9次大规模的小麦赤霉病流行，给农民带来了巨大的经济损

氮素是地球上生命体重要的基本组成元素之一，参与植物体生长发育、物质合成与代谢等一系列生物学过程。初农生物研究员发现尽管大气中氮元素含量极其丰富，却不能被植物直接利用。与大多数其他植物不同，豆科植物可以通过与根瘤菌科固氮菌建立共生关系获取大气中的氮元素，固氮菌侵入植物根系组织并诱导增殖形成根瘤。在受侵染的根瘤细胞中，细菌分化形成类似于细胞器样的结构，其中含有氧敏感的固氮酶复合物，用于将氮气固定为氨态

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