[实验动物] 
蟾蜍 
 
[实验材料] 
蛙类手术器械、培养皿、滴管、任氏液、神经标本盒、计算机生物信号实时记录分析系统MS2000（或BL-310）、刺激电极、引导电极、2%普鲁卡因溶液、1ml注射器�

[实验步骤] 
一、制备蟾蜍坐骨神经干标本 
1、 破坏蟾蜍脑脊髓： 取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净。左手握蛙，用食指下压头部前端，拇指按压背部，使头前俯。中指与无名指夹其前肢，无名指与小指夹其后肢，使整个躯干做最大屈曲。把探针自枕骨大孔处垂直刺入，到达椎管，即将探针改变方向刺入颅腔，向各侧不断搅动，彻底捣毁脑组织；再将探针原路退出，刺向尾侧，捻动探针使其逐渐刺入整个椎管内，完全彻底捣毁脊髓。脊髓破坏完全的标志是：下颌呼吸运动消失，反射消失，四肢松软。

2、剪除躯干上部和内脏，去皮，制备下肢标本： 用粗剪刀在骶髂关节前1厘米处剪断脊柱，握住蟾蜍下肢， 沿躯干两侧（避开坐骨神经）剪开腹壁。此时躯干上部及内脏即全部下垂。剪除全部躯干及内脏组织。剪去肛周皮肤；用圆头镊子夹住脊柱，注意不要碰到坐骨神经，捏住皮肤边缘，逐步向下牵拉剥离皮肤。将全部皮肤剥除后，把标本置于盛有任氏液的培养皿中。 
3、洗净双手和用过的全部手术器械。 
4、分离两下肢： 避开坐骨神经，用粗剪刀从背侧剪去骶骨，然后沿中线将脊柱剪成左右两半，再从耻骨联合中央剪开，将已分离的标本浸入盛有任氏液的培养皿中。 
5、坐骨神经干标本制备： 取出一下肢，用蛙钉固定于蛙板上，固定时要注意，坐骨神经和腓肠肌朝上。先用玻璃分针沿脊柱侧游离坐骨神经腹腔部，然后循股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟，纵向分离暴露坐骨神经之大腿部分直至窝，下沿腓总神经与胫神经一直分离至踝关节附近止。在分离过程中，把神经周围的结缔组织去除干净，并把神经的细小分支剪断，但要注意不要用金属器械碰触神经，也不要对神经过度牵拉。实验期间应不断滴加任氏液使神经保持湿润。在游离出的神经两端各系一线，然后剪断。将制备出的神经标本放置于盛有任氏液的培养皿中备用。将另一下肢的坐骨神经也依此法分离出来。

Experiment of Nerve Trunk AP
[Purpose]
1. learn the basic operation of sciatic nerve specimen
2. observe the wave-form of the AP on the sciatic nerve
3. learn the measurement of calculating the conduction velocity
4. observe the periodical change of nerve excitability
5. observe the influence of drug on AP 
[Principle]
The AP of a nerve trunk is the objective symbol when the nerve excites.The nerve trunk is composed of kinds of nervous fibers.It is an intergrated potential change that a lot of action potentials of nervous fibers synthesized.So the AP of the nerve trunk is different from the one of single nervous fibers that the amplitude of the AP of nerve trunk can be various in a certain range as the stimulant intensity changing.

The out membrane potential is lower than RP in exciting part. With the nerve impluse passing, the out membrane potential returns to RP. The process of membrane potential changingin nerve trunk is call AP of nerve trunk.If two leading eletrodes are placed on the surface of a normal nerve trunk,two reverse potential deflection are induced that are called a biphasic AP when an excitation traverses two electrodes successively.If the nerve tissue between two leading electrodes are injured,the excitation only traverses the first leading electrodes,but not passes the second one.A unidirectional potential deflection is induced that is named a monophasic AP in the situation.

The conduction velocity of Ap is different because of different kinds of nervous fibers. The velocity is depending on the diameter of nervous fibers,whether it has myelin sheath,PH and temperature.The sciatic nerve of toad mainly contains Aα fibers, whose conduction velocity is 35-40M/s.Measure the distance of nerve impluse conducting on nerve trunk and the time.Then we cancalculate the conduction velocity by V=s/t
 
 After receiving one stimulus,the excitability of excitable organ can develop a regular periodical change,going through absolute refractory period, relative refractory period, supranormal period and subnormal period,then recover to normal level of excitability. To measure the change of excitability after one excitation,we can order a conditioned stimulus to a nerve which induce the nerve excitation. Then give it a check-up stimulusduring the different periods of excitation. Determine the change of nerve excitability according to the responses and amplitude of AP to the stimulus.

3.Observation items
1.Recoed the nerve trunk AP
 (1)Observing the biphasic AP
a.Keep the equipment in sampling condition.Give the specimen an upper-threshold stimulus as above 
b.Observe the wave form of biphasic AP of sciatic nerve
c.Change the stimulation intensity. Observe the relationship between stimulation intensity and the amplitude of AP. Find out the min stimulation intensity(max stimulation intensity) that can cause the maximum AP.
d.Reverse the sciatic nerve specimen, observe the change of biphasic AP
e.Switch the electrodes, observe the change of biphasic AP
 (2).Observing the monophasic AP: clip the nerve between two record electrodes by tweezers in order to injure the nerve. We can observe the monophasic AP 

2.Calculating the conduction velocity of AP
Place another sciatic nerve specimen in the shield-box, induce the biphasic AP as follows. Click the guage,limit the cursor at the pseudo-track strating point to Ap strating point in order to get the time from giving stimulus to Ap appears.Measure the distance between two electrodes,input the data to computor,calculate the v.
 
3.measure the refractory period
(1).Adjusting to the maximum stimulation intensity, induce the biphasic AP
(2)Adjusting time intervals of successive single stimulus in order that two independent wave-forms of biphasic AP appears
(3)Lower the time intervals gradually, make the latter one fusing with the former one.When the latter one becoming small suddenly,record the point T2.It illustrates that it has already gone through the relative refractory period of the previous AP. Keep lower the time intervals,when the latter one disappearing suddenly,record the point T1.It meas that it has entered the absolute refractory period of the previous AP. The absolute refractory period is from pseudo-track strating point to T1. The relative refractory period is from T1 to T2

 4.The influence of Procaine on sciatic nerve AP
Stimulate the sciatic nerve trunk with 2% procaine cotton.After 10 min,remeasure the conduction velocity, refractory period. Observe the change of conduction velocity, refractory period with the former.

[Notice]
1. Do not hurt the nerve during the separation in order to avoid the influnce of results.
2. the sciatic nerve specimen should be as long as possible,8cm above is the best. Wash it with Ringer’s solution on times to keep its good excitability.
3. Keep the nerve trunk in good touch with electrodes.The distance between two electrodes should be as long as possible.

发现又是一个没人顶的，顶下吧...

辛苦啊，像这种好东西，值得顶哦！

记录神经干动作电位试验中为何记录出双向动作电位

这还用翻译啊，课本上都有的，我还以为你说的是实验讨论呢，哎。。。