关于qRT-PCR绝对定量做标准曲线的问题【分子生物学吧】

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想请教一下各位，做标准曲线，稀释后涡旋多久呢？我的三个重复的点怎么都不在一起，分散开的，做的也是5个梯度的？着急呀~这次每管涡旋了5分钟，是不是太久了呢？
样品是烟草衰老时期的叶片，模板是提取RNA后反转录，连接T载体后提取的质粒。
谢谢大家！

送TA礼物

1楼2013-01-14 16:16回复

您好，不需要混匀那么久的，几秒钟就可以，我做荧光定量PCR多年，标准曲线的slope一般为-3.2，质粒是比较纯的东西，不会稀释不好的，要有耐心，如有需要我们可以再交流，另外您做实验室是否要用到限制性内切酶、琼脂糖等，如有需要可以登录我们公司网站www.rongbio.com查询

2楼2013-02-05 15:20

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