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新一代核酸染料—GelRed 和GelGreen

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(更安全、更灵敏、更稳定)
要想获得安全的凝胶染料必须能清除或最小化染料和基因组DNA的相互作用。基于这种原则,科学家们结合物质的结构特点,开发出了一款不会渗透乳胶手套腈类手套和生物细胞膜的一种染料。
GelRed 和GelGreen是为代替高毒性的EB设计产生的新一代荧光核酸染料。由Biotium公司开发。相对于EB和其他的EB替代物,GelRed 和GelGreen有更多的优势:低毒性,高灵敏性,高稳定性。
EB由于其价格低和足够高的灵敏性,使其成为近几十年来最常用的核酸凝胶染料。但是EB是一种强诱变化学试剂。由于其存在的安全危害以及处理污染物所花费的大量金钱,使其使用变得并不廉价,也不再方便。基于这种原因,替代品开始出现,比如SYBR系列染料近年来开始应用于市场中。但这些产品虽然降低了危害性,却损失了产品的灵敏性和稳定性。比如SYBR Safe的灵敏性很低,SYBR Green和SYBR Gold相对于EB的稳定性要差很多。SYBR系列的染料也能进入细胞染色线粒体以及核内的DNA,从而产生危害。SYBR Green I已被证实在紫外光下将会产生强诱变能力,使DNA或其他物质发生突变(Ohta,et al.Mut Res 492,91(2001))。
一种安全的染料应该不能穿过细胞膜进入活细胞中,不会引起基因毒性。研究人员从结构入手开发了GelGreen和GelRed,这两种染料都不能穿透细胞膜进入细胞。艾姆斯氏实验已证明高于使用浓度的GelRed 和GelGreen没有诱变能力,http://www.solarbio.com
SYBR Safe则不能做到。此外,环境安全实验也显示GelRed 和GelGreen对水栖动物没有影响,因此GelRed 和GelGreen没有环境破坏性,使用后能做一般的处置。
GelRed 和GelGreen特点:
更安全:艾姆斯氏实验以及其他实验证实无诱变性无细胞毒性;
更方便处理:通过了环境安全实验,可以直接丢弃无需特殊处理。
超灵敏:比EB和SYBR Safe更灵敏。
更稳定:室温下,溶液中可稳定存在。
使用更方便:可预染也可后染。http://www.solarbio.com
与常用的仪器兼容:GelRed 可用EB常用仪器观察;GelGreen可用SYBR染料仪器进行观察。
可用于下游实验:普通的胶回收后,可用于下游实验。
EB GelRed

SYBR Safe GelGreen

图1. GelRed 和GelGreen比EB和SYBR Safe更灵敏。左图:比较了GelRed 和EB 的1%预制胶,TBE缓冲液跑胶。右图:比较了GelGreen和SYBR Safe 1%琼脂糖凝胶的后染状况,同样在TBE缓冲液中完成。选用了Invitrogen的1 Kb的DNA Ladder作2倍稀释,分别加入四个泳道中,从左向右依次为200ng,100ng,50ng和25ng。
SYBR Safe GelRed GelGreen

图2. GelRed 和GelGreen更安全,因为它们不能穿过活细胞的细胞膜结合到DNA上。用1×SYBR Safe,GelRed 和GelGreen分别在37℃孵育Hela细胞。随后用FITC处理过的SYBR Safe和GelGreenGelRed 及Cy3处理GelRed孵育细胞。SYBR Safe很快进入细胞使核染色。GelRed 和GelGreen不能穿过细胞膜,不能观察到被染上色的细胞,仅在少量死亡的细胞中看到零星的荧光。http://www.solarbio.com


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https://mp.weixin.qq.com/s/MLjGaidfHqmhN_V09IE84g 关于无毒核酸染料的那些瓜


2025-08-20 18:03:31
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