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粪便DNA提取

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粪便中提取HP的DNA,粪便中抑制物较多,比较难处理,请问有没有好的提取方法?


IP属地:浙江1楼2019-03-19 17:05回复
    粪便首先要做预处理:粪便标本加人装有2mL无菌PBS缓冲液(0.05mol/L,pH 7.4)试管中充分振荡摇匀5~10min后3000转/分(rpm)离心5min,收集上清液,此步骤重复2次,最终收集上清液每份1ml置于1.5ml 离心管中。然后上清液12000rpm离心l0min,弃上清后,沉淀物在lmL双蒸水(ddH20)中悬置,混和后12000rpm离心5min,此步骤重复2次,收集沉淀。接下来的步骤就是用酚氯仿的抽提的方法。不过这种化学法花费时间长效果也不一定好,而且苯酚氯仿什么的有毒,用试剂盒操作就安全 简便多了,时间短,差不多半小时就可以了。常用的有凯杰QIAGEN,天根tiangen,百代BIOG等。


    2楼2019-03-21 08:35
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