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50℃时也能有较好的逆转录表现吗?

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产品特点
◎基因工程改造的逆转录酶,具有较高的热稳定性,即使在摄氏50多度时也有较好的逆转录表现;
◎可有效克服RNA模板二级结构的影响,对于具有二级结构的RNA模板也能获得理想的实验结果;
◎对RNA模板具有更高的亲和力,可检测到低至1pg总RNA中的目标片段,特别适合于总RNA量较少以及目标RNA拷贝数较低情况下的逆转录。
产品介绍
BIOG Super Reverse Transcriptase是公司美国团队在西雅图的实验室研发出的一款具有卓越性能的逆转录酶。利用基因工程技术,我们成功地将BIOG Super的热稳定性大幅提高,即使在摄氏50多度时也有较好的逆转录表现,从而有效克服了RNA模板二级结构对逆转录反应的影响。与其它品牌的逆转录酶相比,BIOG Super与RNA模板具有更高的亲和力,更容易获得完整的cDNA片段,并可检测到低至1pg总RNA中的目标片段,特别适合于总RNA量较少以及目标RNA拷贝数较低情况下的逆转录。
说明:1、引物还可以使用Oligo(dT)18 (50μM)或Random hexamers (50ng/μl)。2、模板如使用Poly(A)+RNA,用量一般在10pg-500ng之间。3、反应条件:如使用Oligo(dT)18或基因特异性引物,建议反应条件为:50℃逆转录反应45分钟,再85℃ 5分钟灭活逆转录酶。如要获取的cDNA长度大于5kb,逆转录时间可延长到60分钟。使用Random hexamers,反应条件建议为:25℃ 5分钟,50℃ 45分钟,85℃ 5分钟。如模板RNA有二级结构或GC含量较高,逆转录温度可设置为55℃。4、为获得理想的实验结果,建议实验者进行适当的优化摸索。5、用于PCR反应的cDNA产物体积一般不要超过PCR反应体积的1/10。


1楼2022-04-29 14:28回复