求教诸位前辈,
小弟的课题和X染色体失活相关,设计了X染色体上的等位基因引物,PCR产物中包含STR位点用于区分等位基因,
但扩增出的等位基因电泳峰的峰高比例经常严重偏离1:1的状态,少量样本能到7:3或8:2的情况,
样本、引物、缓冲液、dNTP、Polymerse和PCR流程温度时间等条件都验证过,但都没有解决,大量样本的等位基因峰高依然不是1:1,
所以请教诸位前辈这可能是什么问题,应该如何解决?
小弟的课题和X染色体失活相关,设计了X染色体上的等位基因引物,PCR产物中包含STR位点用于区分等位基因,
但扩增出的等位基因电泳峰的峰高比例经常严重偏离1:1的状态,少量样本能到7:3或8:2的情况,
样本、引物、缓冲液、dNTP、Polymerse和PCR流程温度时间等条件都验证过,但都没有解决,大量样本的等位基因峰高依然不是1:1,
所以请教诸位前辈这可能是什么问题,应该如何解决?