第一步，筛选c-FLIP泛素化相关的酶-USP7
TRIP13如何介导c-FLIP的泛素化呢？采用生物信息学方法筛选GO和KEGG数据库中与泛素化相关的条目。利用STRING数据库构建蛋白-蛋白相互作用网络后，分析发现10个核心靶点，包括USP7、USP13、USP14等（图1a）。USP7是一种表征良好的去泛素酶，研究证实，TRIP13可直接与USP7结合，促进其去泛素酶活性。推测TRIP13可能通过USP7调节c-FLIP的水平。此外，分析显示TRIP13、USP7和c-FLIP在TNBC中表达较高，且TRIP13、USP7和c-FLIP呈正相关（图1b）。提示TRIP13、USP7和c-FLIP在TNBC的发生发展中起着至关重要的作用。
第二步，THC通过靶向TRIP13抑制USP7介导的去泛素化，促进c-FLIP的泛素化
THC处理细胞发现，USP7表达的剂量依赖性降低（图1c）。体外去泛素化实验进研究USP7在THC靶向TRIP13介导的c-FLIP泛素化中的作用（图1d），Co-IP分析发现THC促进TNBC中c-FLIP的泛素化，但重组USP7蛋白的加入逆转了THC诱导的c-FLIP泛素化水平（图1e），表明USP7的去泛素化活性降低了c-FLIP的泛素化。此外，重组TRIP13和USP7蛋白的存在进一步降低了c-FLIP的泛素化水平（图1e），表明TRIP13增强了USP7的去泛素化作用。因此，在THC通过靶向TRIP13介导c-FLIP泛素化的过程中，USP7可能发挥了重要的中介作用。
图1 THC结合TRIP13抑制TRIP13/USP7/c-FLIP三元复合物相互作用介导c-FLIP泛素化（Ref. Fig 4/5/S10）
全文分享：《J Adv Res》解读：药物单体机制怎么做？四氢姜黄素靶向TRIP13促进c-FLIP泛素化降解抑制乳腺癌进展。
如有相关科研问题，欢迎留言探讨。
TRIP13如何介导c-FLIP的泛素化呢？采用生物信息学方法筛选GO和KEGG数据库中与泛素化相关的条目。利用STRING数据库构建蛋白-蛋白相互作用网络后，分析发现10个核心靶点，包括USP7、USP13、USP14等（图1a）。USP7是一种表征良好的去泛素酶，研究证实，TRIP13可直接与USP7结合，促进其去泛素酶活性。推测TRIP13可能通过USP7调节c-FLIP的水平。此外，分析显示TRIP13、USP7和c-FLIP在TNBC中表达较高，且TRIP13、USP7和c-FLIP呈正相关（图1b）。提示TRIP13、USP7和c-FLIP在TNBC的发生发展中起着至关重要的作用。
第二步，THC通过靶向TRIP13抑制USP7介导的去泛素化，促进c-FLIP的泛素化
THC处理细胞发现，USP7表达的剂量依赖性降低（图1c）。体外去泛素化实验进研究USP7在THC靶向TRIP13介导的c-FLIP泛素化中的作用（图1d），Co-IP分析发现THC促进TNBC中c-FLIP的泛素化，但重组USP7蛋白的加入逆转了THC诱导的c-FLIP泛素化水平（图1e），表明USP7的去泛素化活性降低了c-FLIP的泛素化。此外，重组TRIP13和USP7蛋白的存在进一步降低了c-FLIP的泛素化水平（图1e），表明TRIP13增强了USP7的去泛素化作用。因此，在THC通过靶向TRIP13介导c-FLIP泛素化的过程中，USP7可能发挥了重要的中介作用。
图1 THC结合TRIP13抑制TRIP13/USP7/c-FLIP三元复合物相互作用介导c-FLIP泛素化（Ref. Fig 4/5/S10）
全文分享：《J Adv Res》解读：药物单体机制怎么做？四氢姜黄素靶向TRIP13促进c-FLIP泛素化降解抑制乳腺癌进展。
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