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HE染色切片详细流程图文版!

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HE染色切片详细流程图文版!
主要用到的试剂:固定液-10%中性福尔马林、梯度浓度乙醇、二甲苯/苯、苏木精-伊红、苏木精分化液&返蓝液、封片剂(我用的透明指甲油)
注意事项:
✨固定时间:固定不足会导致组织自溶,尽量扩大固定时间,若固定时间过长可适当加大后续的冲洗时间
✨梯度脱水设置:可以根据组织的脆弱程度,适当删减/增加梯度设置和脱水时间;时间过长容易导致组织变脆,显微下难以观察整体,过短会使脱水不彻底,切片容易变形(最容易导致HE失败的一步
✨透明化:时间不易过久,通常为1-3min,重复2-3次,根据组织厚度进行调节
✨染色:通常苏木精浓度较大,染出来的组织颜色太深,不好观察,可根据组织的情况对苏木精进行稀释,并调节染色时间(伊红同理,两种染液最好控制变量)
✨封片:滴加不宜过多,容易产生气泡,封片时最好从侧边轻放,等待自行干透(惨痛经历:切勿用手按压,会导致组织脆碎)
其实感觉比wb还玄学,梯度脱水这一步最好拿样本多试几个方案




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