当确定了色谱柱之后，应考虑到色谱的建立需要一定的色谱条件，主要体现在溶剂、流动相及流速等方面，溶剂的选择需要考虑溶解效果和分离效果；流动相要根据样品及表征物质的性质，结合溶剂的选择来考虑，一般情况下，流动相应考虑极性与非极性；流速一般根据研究需要和预热过程实验调节。